一種活細胞倒置熒光顯微鏡溫度校準方法介紹
來自：清漾實業編輯部 更新日期：2020/9/5 點擊量: 5595
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活細胞培養熒光顯微鏡由于可以進行活細胞常規培養條件，例如：溫度控制、濕度控制、CO2 濃度控制、O2 濃度控制，同時配置高速攝像頭可以進行時間序列（Time-Lapse），結合多色熒光濾片切換，LED 單波長光源激發，可配備相差（Phase Contrast），微分干涉（DIC），熒光等對照方式可以更加直觀詳細的進行細胞形態記錄而受到廣大科研用戶的認可。近年來，倒置熒光顯微鏡配置活細胞培養裝置的相關實驗越來越普遍，目前市面上集成的熒光成像系統很多，例如：GE 公司的 DELTAVISION 活細胞成像系統，ZEISS 公司的 CELL OBSERVER 系統，或其它大品牌公司的整套活細胞成像系統，價格昂貴（20 萬美元以上），維護成本高，廠家工程師上門速度通常比較慢或者收費貴，常規實驗室難以負擔。目前各實驗室通常都配備有倒置熒光顯微鏡，活細胞培養裝置是模塊化設計的產品，廣州科適特科學儀器有限公司提供一種優惠簡便的解決方案，定制整套活細胞或對現有的熒光顯微鏡進行活細胞升級，購置成本低，拆裝方便，兼容目前市場主流的各大顯微鏡平臺，例如：徠卡，尼康，奧林巴斯，蔡司等都可以提供定制的適配器。 活細胞培養裝置中溫度控制是一個重要的實驗參數，但是由于活細胞培養的探測器通常位于培養腔室的上壁邊緣，由于室溫（例如 22℃）與培養箱中設定溫度（例如 37℃）偏差比較大，溫度傳導散熱效應，顯微鏡細胞培養箱培養皿中細胞真實的溫度難以達到設定溫度，為了保證真實培養溫度精確，顯微鏡活細胞培養在不同的實驗室環境首次使用前通常需要進行校準（Calibration）。 最近剛好有廣州科適特科學儀器有限公司的裝機客戶跟我們咨詢溫度校準的問題，借此契機，以我們公司代理的 IBIDI 活細胞培養裝置為例簡單介紹一下活細胞培養裝置溫度校準的問題。廣州科適特科學儀器有限公司是德國 IBIDI 活細胞培養產品的國內授權代理，價格優惠，發貨速度快。下面以廣州科適特定制的活細胞熒光顯微鏡為例，簡單介紹一下如何做活細胞培養裝置的溫度校準。 一、顯微鏡活細胞裝置的組成通常包含活細胞培養腔體，控制模塊單元，加濕柱，連接導管，CO2 氣瓶，壓縮空氣瓶等配件。 二、培養箱腔體由上蓋（LID）和加熱底板（PLATE）組成，通過適配器固定在倒置顯微鏡的載物臺上，內部有溫度探頭，氣體輸入輸出接口，控制面板可以設置氣體的流速，CO2 及O2 濃度等參數。. 三．取出校準專用小工具，校準用溫度探頭，即一條可插入培養皿內部的線纜。上蓋有開孔的校準培養皿。將探頭插入校準培養皿的小孔，用此探頭監測實時培養皿內部的溫度。目的是將內部溫度設置為活細胞目標溫度（例如:37℃）。 四．打開溫度控制器電源開關，在控制器的前端 LED 面板上會顯示相關的參數。控制器最多可以控制 4 個通道的溫度設置，活細胞培養裝置上蓋和底板是可以加熱的，通常只需要占用前面兩個通道，I 指示的內部探頭的溫度，S 指示的設定溫度，E 指示的是外部探頭的溫度。例如我們希望活細胞培養皿內的溫度為 37℃，則我們可以通過調節上蓋（通道 1）和低加熱板（通道 2）的設定溫度，當 E 指示的外部探頭溫度達到 37℃，并能持續 15 分鐘保持不變。則校準工作完成。 五．校準工作完成后，記錄下上蓋（LID）和下加熱板（PLATE）的設定溫度。每次開始實驗工作時，只需要將設定溫度保持在我們已經校準好的溫度，則可以認為培養皿內部實驗環境的溫度可以保持在目標溫度，例如 37℃。此過程類似于在開展活細胞培養實驗之前進行的預實驗。 六．倒置熒光顯微鏡活細胞培養模塊化設計，此設備可以兼容各大顯微鏡品牌，如果實驗室有多臺不同品牌倒置顯微鏡，只需要一臺即可隨用隨裝，方便實用。 |
